KG-1急性骨髓性白血病细胞

  • 产品编号:SZJNK-00025
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产品简介

 

SZJNK-00025

 

1×106 cells1T25/2冻存管)

 

急性骨髓性白血病

 

悬浮

培养基

KG-1细胞专用培养基(货号: SZJNK-00025-001

 

 


基本信息

中文名称

急性骨髓性白血病细胞

别称

KG-1

细胞货号

SZJNK-00025

细胞背景

KG-1是一种急性骨髓性白血病(AML)细胞系,最初由H.P. KoefflerD.W. Golde从一位59岁白人男性的骨髓抽取物中建立,该男性最初患有红白血病,后来发展为急性粒细胞性白血病。细胞在形态上类似急性髓原白血病,表现为明显的多形性,骨髓母细胞和骨髓细胞占优势。KG-1细胞少量是成熟的粒细胞,也有微量的巨噬细胞和嗜曙红细胞。KG-1 髓母细胞在佛波醇酯存在下可分化为巨噬细胞。它们对集落刺激因子 (CSF) 有良好的反应。该细胞系为 EBNA 阴性 (EBNA-)
在急性髓性白血病研究中,KG-1细胞系得到以下应用:耐药性研究、细胞分化研究、基因和蛋白质表达研究、细胞信号传导研究、细胞凋亡研究、白血病干细胞研究、药物筛选和毒性测试、基因突变或异常表达研究、信号通路异常研究、免疫细胞异常研究等。

细胞形态

淋巴母细胞样

供体来源

男性 59

细胞类型

肿瘤细胞

收录

ATCC

培养条件

37℃;5% CO2;饱和湿度

培养体系

KG-1专用培养基(货号:SZJNK-00025-001

倍增时间

38~45hours

冻存条件

冻存液50% 基础培养基 + 40% FBS + 10% DMSO;液氮

细胞活力

台盼蓝染色

无菌检验

阴性(√);阳性( )

支原体检验

阴性(√);阳性( )

 


使用说明

处理方式

常温细胞处理

1、收到常温细胞后,及时拍照并记录有无漏液、瓶身破损现象;

2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,在显微镜下观察细胞状态。先不打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内平衡复温2-4小时,稳定细胞状态;

3、细胞稳定后,仔细阅读本说明书,了解细胞生长特性、培养体系、冻存条件、传代步骤等相关信息;

4、吸走大部分培养基离心备用,留10-12 ml培养基,拍照并观察细胞。若细胞密度高于80%,可吸走培养基进行传代;若密度低于80%,则留10-12 ml继续培养至密度高于80%后再传代;

5T25瓶首次传代建议按1:2比例进行,即1T25瓶传为2瓶。

冻存细胞处理

1、收到细胞后,开箱拍照,将冻存管置于冰上核对细胞信息,同时观察冻存管是否完好、有无解冻情况;

2、若收到细胞当天不复苏,需及时将细胞转移至液氮罐(过程需迅速,避免细胞离开低温区域);若无液氮罐,可短时间保存在- 80℃冰箱,长期保存仍需置于液氮罐;

3、提前准备适合该细胞生长的培养基,从冰箱取出后需恢复至室温再使用;

4、复苏1管至1T25瓶或6 cm培养皿中。复苏后可取少量细胞计数并检测活力。

 

« 注意事项

1、若培养瓶或冻存管出现破损、漏液,及时拍照联系销售反馈,按指导处理;仅外包装破损一般不影响使用;

2、细胞增殖较快,发货细胞量较多时培养基可能变黄。使用此类培养基时,需及时观察颜色变化,缩短换液周期,每瓶多加2-3 ml培养基;

3、若无法观察到细胞,建议收集培养基,1200rpm离心5分钟,观察细胞沉淀量,并用少量培养基重悬沉淀,取部分悬液至计数板或载玻片观察;

4、本公司提供细胞株技术服务及相应费用,提供完善技术支持和售后服务,收到产品后的处理方式及售后条款参见《细胞售后条例》。

细胞复苏

1、将水浴锅预热至37℃,在无菌离心管中提前加入4 ml培养基待用;

2、从液氮罐或-80℃冰箱中取出需复苏的细胞,将细胞冻存管迅速没入水浴锅,摇晃冻存管加速溶解,溶解时间约1-2分钟;

3、在超净台中将融化的细胞悬液加入装有4 ml培养基的离心管,1000 rpm(约300 g离心力)离心5分钟,弃上清;

4、用适量完全培养基重悬细胞,转移至T25细胞培养瓶,补充培养基至5 ml,放入培养箱培养,第二天观察细胞状态和密度。

细胞传代

当细胞密度大于80%时即可进行传代培养,步骤如下:

1尽量吸净T25瓶中的原培养基;

2加入3-4 ml常温不含钙、镁离子的PBS,轻轻润洗细胞1-2次后吸走PBS

3T25瓶中加入1 mlEDTA的胰酶,轻轻晃动培养瓶,使胰酶均匀分布于瓶底细胞层;

4将培养瓶放入37℃培养箱消化;

5待细胞变圆并开始脱落时,加入1 ml完全培养基终止消化;

6轻轻吹打使细胞脱落转移至无菌的5 ml离心管,1000rpm离心5分钟,弃上清;

7加入新的完全培养基轻轻重悬细胞,将细胞转移到新的培养瓶中并摇匀,加入5 ml完全培养基培养

消化时间:不同品牌胰酶消化时间不同,需注意控制

传代比例1:2-1:4(具体根据细胞生长速度及密度调整)

换液频次2-3

 

细胞售后条例

1、购买的冻存细胞发2管,先复苏第一管,再视情况复苏第二管;

2、复苏第一管出现问题,联系我方分析原因并指导复苏第二管;在技术支持下仍无法存活的,可重发常温细胞;重发冻存细胞需加收干冰费用(需及时拍照反馈);

3、冻存细胞发货2支为同一批次,一管复苏成功另一管失败的,不予重发;

4、收到冻存细胞复苏后状态良好,但因用户自身操作导致细胞污染、状态不佳、冻存后复苏失败的,不予免费重发;

5、细胞运输途中出现冻存管破损、融化等问题,予以重发(需及时拍照反馈);

6、因外源试剂导致细胞培养出现问题或污染的,不予重发;

7、细胞复苏和培养过程中出现问题,反馈不及时(默认收到细胞后一周内无反馈)且无法提供复苏后状态图片的,不予免费重发;

8、非细胞出厂质量问题,因客户自身操作导致细胞死亡的,自收货日起一个月内可申请低价二次购买折扣(原代细胞除外);

9、细胞相关实验受培养基及血清品牌、操作习惯、培养瓶品牌等多种因素影响,因非细胞鉴定问题导致实验数据不理想的,不予退换细胞;

10、细胞系与对应专用培养基一起购买的,自收货日起一个月内可享受无条件售后(原代细胞不参与);

11、请保留细胞/培养基标签上的二维码,需售后或技术支持时可扫描相关二维码与我司联系。

相关论文

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